【摘要】 MDA作为氧自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的代谢产物,其含量的变化可间接地反映组织中氧自由基含量变化。SOD作为一种抗氧化酶,有助于清除氧自由基,具有清除、防止活性氧合成和蓄积,阻断脂质过氧化连锁反应,保护细胞免受毒害的作用[2]。
【关键词】 五福心脑清,多发脑梗死性痴呆,SOD,MDA
由于患者的生活能力下降,严重威胁着老年人的健康和生存质量,给家庭和社会造成了巨大负担, 随着血管性痴呆的发病率绝对及相对地增多,使血管性痴呆的防治研究具有实际应用前景。五福心脑清由精制红花油、冰片等组成,具有活血化瘀、通络开痹等功效。故本实验通过用大鼠自体血栓造成的多发性脑梗死模型,观察五福心脑清对此模型的保护作用。
1 材料与方法
1.1 仪器 全自动生化分析仪(TBA-120FR,日本)。
1.2 试剂与药物 超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒购于南京建成生物试剂公司。五福心脑清软胶囊:0.4g/粒,由神威药业有限公司提供(批号:0403171),含精制红花油、冰片、维生素E、维生素B6。复方丹参滴丸:天津天士力制药股份有限公司产品(批号:20040306)。
1.3 实验动物 Wistar大鼠,购于北京维通利华公司,SPF级,雄性,体重240~260g。合格证号:SCX(京)2002-0003。
1.4 实验分组 五福心脑清软胶囊低、中、高剂量组(162、324、648mg/kg),复方丹参滴丸组,模型组,假手术组和正常组。
1.5 大鼠多发性脑梗死模型的复制 参照文献方法复制脑多发性梗死模型[1],同种Wistar 大鼠左心室内采血,于37℃温箱内干燥,研碎后用200目筛孔过筛,应用时取血栓栓子1mg加生理盐水0.3ml,摇匀成混悬液。10%水合氯醛按3.5ml/kg体重腹腔麻醉,颈正中切开皮肤,剥离胸骨舌骨肌、肩胛舌骨肌与胸骨乳突肌,暴露颈总动脉、颈外动脉与颈内动脉,暂时夹闭颈总动脉以及翼突腭动脉,于颈外动脉逆行插管注入栓子溶液0.3ml,推注同时开放颈总动脉,使栓子通过颈内动脉进入颅内至大脑各动脉,造成多发性脑梗死,开放翼突腭动脉,结扎颈外动脉,缝合皮肤。
1.6 药物干预 各组动物于术后即刻灌胃给药,以后每24h给药一次,连续2周。正常组、模型组及假手术组:生理盐水灌胃,五福心脑清软胶囊低剂量组五福心脑清软胶囊162mg/kg灌胃;五福心脑清软胶囊中剂量组五福心脑清软胶囊324mg/kg灌胃;五福心脑清软胶囊高剂量组五福心脑清软胶囊648mg/kg灌胃;复方丹参滴丸组:复方丹参滴丸36.45mg/kg灌胃。各组给药体积用生理盐水调整至10ml/kg。
1.7 指标检测
1.7.1 血清SOD、MDA 于复制模型2周后,各实验组大鼠球后静脉丛取血,全自动生化分析仪参照试剂盒说明书检测血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。
1.7.2 病理形态 于复制模型2周后,各实验组部分大鼠10%水合氯醛按3.5ml/kg体重腹腔麻醉,经左心室灌注0.01M磷酸盐缓冲液,pH值7.4,待灌注液清亮,灌注4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液10min,取脑,放入4%多聚甲醛磷酸盐缓冲液外固定。石蜡包埋,切片,行HE染色,光镜观察。
1.8 统计学方法 数据以x±s表示,进行方差分析,F检验,组间比较,q检验。
2 结果
2.1 五福心脑清软胶囊对大鼠多发性脑梗死模型血清SOD、MDA的影响 见表1。
表1 五福心脑清软胶囊对大鼠多发性脑梗死模型血清SOD、MDA的影响
实验结果表明,模型组大鼠血清SOD活性较正常组降低,各治疗组与模型组比SOD活性均有所升高,模型组大鼠血清MDA浓度较正常组升高,各治疗组与模型组比,MDA浓度均有所降低。
2.2 五福心脑清软胶囊对大鼠多发性脑梗死模型形态学的影响 HE染色结果表明,模型组可见大片脑组织坏死,坏死区周围可见胶质细胞增生,残余组织可见神经细胞变性,脑实质有水肿,坏死区的血管可见栓塞。各治疗组脑实质坏死面积明显小于模型组,在皮层可见筛状软化灶,软化灶周围及坏死灶中可见散在胶质细胞增生,神经元仍有变性(图1~12)。
3 讨论
脑缺血时产生大量氧自由基,细胞内SOD减少,氧自由基不能被清除,细胞膜磷脂中多聚不饱和脂肪酸的不饱和双酯键易受氧自由基攻击,导致脂质过氧化反应,激起自由基的连锁-增殖反应,形成一系列的脂质自由基及其降解产物丙二醛(MDA),这些脂质自由基将进一步引起细胞膜的流动性降低,加重脑损伤,是导致该模型动物神经细胞发生迟发性神经元死亡的一个重要原因。
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